午夜精品白在线观看-日本人妻伦在线中文字幕-国内精品久久毛片一区二区-欧美一性一交一伦一A片视频-cijilu在线视频-老师的丰满大乳奶-亚洲精品久久7777777-车上疯狂做爰HD韩国-丰满少妇猛烈进入A片高潮小说-青草视频在线观看视频-最好看最新高清中文字幕电影-最好看十大无码AV-新超碰97在线观人人澡,老女人刮伦内谢视频,成人国成人国产,国产又爽又黄A片,亚洲男人天堂一区二区三区,男人天堂网夜色99视频,亚洲无码专区色爱天堂,少妇高清性色生活片成人片,男男白白嫩嫩小受片小说,加勒比海盗,古装片,爆操无码,免费韩漫完整版漫画在线观看,姝姝下面好湿视频,一级黄色毛片视频,色情免费100部A片看片,久久久无码精品亚洲日韩啪啪网站,亚洲永久无码动漫在线观看 ,国产69精品久久熟女,婷婷综合缴情亚洲狠狠,国产一区日韩二区欧美三区,浴室里强摁做开腿呻吟的视频,亚洲精品久久久小说,污污内射在线观看一区二区少妇,日韩人妻无码精品久久三,欧美亚洲日本一区,男同桌上课时狂揉我下面污文,麻豆精品一区二区三区,老师洗澡让我吃她胸的视频,久久久久亚洲无码观看黑人,久久精品手机观看

1.玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;

2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養板照射3小時以上;

3.培養基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養基內,用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養基5-10ml置培養箱內培養2-3天,肉眼見無渾濁或沉淀等異物.分裝后置-20度保存;

4.消化液(pH7.8)或其它加入液,應用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌,分裝成支置-20度保存;

5.培養箱應先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線的應照射1小時以上,如有高溫滅菌的應按程序來菌).至少每月一次.

6.進入操作時應注意先清洗雙手及手腕,然后用75%酒精擦拭,操作時注意無菌臺內空間層次.手及物品不要在暴露的瓶口上方來往,如果數量較多,培養瓶應放在與酒精燈平行地方便于操作,瓶與瓶之間應相隔一定的距離,開瓶(蓋)時應先用75%酒精反復擦拭或用燈燒,開后應用燈先燒口,然后燒蓋.用完后同樣操作.整個操作過程盡量在無菌臺靠里面一點.

傳代:

1.貼壁細胞:
對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱.50ml培養瓶加入消化液約0.6ml,按此比例進行消化,(根據配制強度經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗.

2.懸浮細胞:
一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離500rpm,5mi后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養.

傳代細胞培養注意事項：

1.嚴格的無菌操作

2.適度消化：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養細胞形態的變化，一旦胞質回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化 。