一、細胞準備工作
準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培育基與其他試劑的制造、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培育箱及其他儀器的檢查與調試等。
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二、選材
在無菌環境下從機體取出某種安排細胞，通過必定的處理后接入培育器血中，這一進程稱為選材。理論上講各種動物和人體內的所有安排都可以用于培育，實際上幼體安排比成年個別的安排簡單培育，分解程度低的安排比分解高的簡單培育，腫瘤安排比正常安排簡單培育。選材后應立即處理，趕快培育，因故不能立刻培育時，可將安排塊切成黃豆般大的小塊，置4℃的培育液中保存。取安排時應嚴厲保持無菌，同時也要避免接觸其他的有害物質。取病理安排和皮膚及消化道上皮細胞時簡單帶菌，為減少污染可用抗菌素處理。
三、培育
將獲得的安排細胞接入培育瓶或培育板中的進程稱為培育。如系安排塊培育，則直接將安排塊接入培育器皿底部，幾個小時后安排塊可貼牢在底部，再加入培育基。如系細胞培育，一般應在接入培育器皿之前進行細胞計數，按要求以必定的量（以每毫升細胞數表明）接入培育器皿并直接加入培育基。細胞進入培育器皿后，立即放入培育箱中，使細胞盡早進入成長狀態。
一般原代細胞培育進入培育后有一段潛伏期，在潛伏期細胞一般不割裂，但可貼壁和游走。過了潛伏期后細胞進入旺盛的割裂成長期。細胞長滿瓶底后要進行傳代培育，將一瓶中的細胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續培育。
