午夜精品白在线观看-日本人妻伦在线中文字幕-国内精品久久毛片一区二区-欧美一性一交一伦一A片视频-cijilu在线视频-老师的丰满大乳奶-亚洲精品久久7777777-车上疯狂做爰HD韩国-丰满少妇猛烈进入A片高潮小说-青草视频在线观看视频-最好看最新高清中文字幕电影-最好看十大无码AV-新超碰97在线观人人澡,老女人刮伦内谢视频,成人国成人国产,国产又爽又黄A片,亚洲男人天堂一区二区三区,男人天堂网夜色99视频,亚洲无码专区色爱天堂,少妇高清性色生活片成人片,男男白白嫩嫩小受片小说,加勒比海盗,古装片,爆操无码,免费韩漫完整版漫画在线观看,姝姝下面好湿视频,一级黄色毛片视频,色情免费100部A片看片,久久久无码精品亚洲日韩啪啪网站,亚洲永久无码动漫在线观看 ,国产69精品久久熟女,婷婷综合缴情亚洲狠狠,国产一区日韩二区欧美三区,浴室里强摁做开腿呻吟的视频,亚洲精品久久久小说,污污内射在线观看一区二区少妇,日韩人妻无码精品久久三,欧美亚洲日本一区,男同桌上课时狂揉我下面污文,麻豆精品一区二区三区,老师洗澡让我吃她胸的视频,久久久久亚洲无码观看黑人,久久精品手机观看

ELISA技術(shù)相關(guān)的其他方法

s

雙位點(diǎn)一步法

上海聯(lián)碩生物科技有限公司

     在雙抗體夾心法測(cè)定抗原時(shí)，如應(yīng)用針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體，則在測(cè)定時(shí)可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步。這種雙位點(diǎn)一步不但簡(jiǎn)化了操作，縮短了反應(yīng)時(shí)間，如應(yīng)用高親和力的單克隆抗體，測(cè)定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應(yīng)用使測(cè)定抗原的ELISA提高到新水平。

     在一步法測(cè)定中，應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)（hookeffect），類同于沉淀反應(yīng)中抗原過(guò)剩的后帶現(xiàn)象。當(dāng)標(biāo)本中待測(cè)抗原濃度相當(dāng)高時(shí)，過(guò)量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成夾心復(fù)合物，所得結(jié)果將低于實(shí)際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體

     當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時(shí)，可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少，因此陽(yáng)性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)。如抗原為高純度的，可直接包被固相。如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì)，直接包被不易成功，可采用捕獲包被法，即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體，然后加入抗原，形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質(zhì)，然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體有多種模式，可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，抗HBc ELISA一般采用此法。另一種模式為將標(biāo)本與抗原一起加入到固相抗體中進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，洗滌后再加入酶標(biāo)抗體，與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)。抗HBe的檢測(cè)一般采用此法。

其方法和特點(diǎn)是：
　　①酶標(biāo)記抗原（抗體）與樣品或標(biāo)準(zhǔn)體中的非標(biāo)記抗原或抗體具有相同的與固相抗體（抗原）結(jié)合的能力； 　      ②反應(yīng)體系中，固相抗體（抗原）和酶標(biāo)抗原（抗體）是固定*，且前者的結(jié)合位點(diǎn)少于酶標(biāo)記與非標(biāo)記抗原（抗體）的分子量和；
　　③免疫反應(yīng)后，結(jié)合于固相載體上復(fù)合物中被測(cè)定的酶標(biāo)抗原（抗體）的量（酶活性）與樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中非標(biāo)記抗原（抗體）的濃度成反比。

ABS-ELISA法
　　ABS為親和素（avidin）生物素（biotin）系統(tǒng)（system）的略語(yǔ)。親和素是一種糖蛋白，分子量60000，每個(gè)分子由4個(gè)能和生物素結(jié)合的亞基組成。生物素為小分子化合物，分子量244。用化學(xué)方法制成的衍生物素-羥基琥珀酰亞胺酯可與蛋白質(zhì)和糖等多種類型的大小分子形成生物素標(biāo)記產(chǎn)物，標(biāo)記方法頗為簡(jiǎn)便。生物素與親和素的結(jié)合具有很強(qiáng)的特異性，其親和力較抗原抗體反應(yīng)大得多，兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于一個(gè)親和素可與4個(gè)生物素分子結(jié)合，因此如把ABS與ELISA法可分為酶標(biāo)記親和素-生物素（LAB）法和橋聯(lián)親和素-生物素（ABC）法兩種類型。兩者均以生物素標(biāo)記的抗體（或抗原）代替原ELISA系統(tǒng)中的酶標(biāo)抗體（抗原）。在LAB中，固相生物素先與不標(biāo)記的親和素反應(yīng)，然后再加酶標(biāo)記的生物素以進(jìn)一步提高敏感度。在早期，親和素從蛋清中提取，這種卵親和素為堿性糖蛋白，與聚苯乙烯載體的吸附性很強(qiáng)，用于ELISA中可使本底增高。從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素則無(wú)此缺點(diǎn)，在ELISA應(yīng)用中有替代前者的趨勢(shì)。由于ABS-ELISA較普通ELISA多用了兩種試劑，增加了操作步驟，在臨床檢驗(yàn)中ABS-ELISA應(yīng)用不多。